1.適用範圍：本檢驗方法適用於酒類中葉黃素（lutein）之檢驗。
2.檢驗方法：高效液相層析法（high performance liquid chromatogra-
phy ，HPLC）。
2.1.裝置：
2.1.1.高效液相層析儀：
2.1.1.1.檢出器：光二極體陣列檢出器（photodiode array detector）
。
2.1.1.2.層析管：YMCTM Carotenoid C30，5 μm，內徑 4.6 ×250 mm
或同級品。
2.1.2.旋渦混合器（Vortex mixer）。
2.2.試藥：甲基第三丁基醚（tert-butyl methyl ether）、乙酸乙酯及
甲醇採用層析級；葉黃素對照用標準品。
2.3.器具及材料：
2.3.1.容量瓶：100 mL，褐色。
2.3.2.離心管：50 mL，PP 材質。
2.3.3.濾膜：孔徑 0.45 μm，Nylon 材質。
2.4.移動相溶液之調製：
2.4.1 移動相溶液 A：甲醇。
2.4.2 移動相溶液 B：甲醇、甲基第三丁基醚及水以 6：90：4 （v/v/v
）比例混合，以濾膜過濾，取濾液作為移動相溶液 B。
2.5.標準溶液之配製：
取葉黃素對照用標準品約 5 mg，精確稱定，以甲基第三丁基醚：甲
醇（１：１， v/v）溶液定容至 100 mL，作為標準原液。使用時再
以甲基第三丁基醚：甲醇（１：１， v/v）溶液稀釋成 1.0～15.0mg
/L，供作標準溶液。
2.6.標準曲線之製作：
精確量取 2.5. 節之標準溶液各 20 μL，參照下列條件進行液相層
析，就葉黃素波峰面積與對應之葉黃素濃度，製作標準曲線。
高效液相層析測定條件：
層析管：YMCTM Carotenoid C30，5 μm，內徑 4.6×250 mm
光二極體陣列檢出器：波長 450 nm
移動相溶液：A 液與 B 液以下列條件進行梯度分析
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時間（min） A 液（％） B 液（％）
0.0→10.0 99→90 1→10
10.0→20.0 90→70 10→30
20.0→30.0 70→0 30→100
30.0→35.0 0→99 100→1
35.0→40.0 99→99 1→1
移動相流速：1.0 mL/min
2.7.檢液之調製：
精確量取檢體 10 mL，置於離心管中，加入乙酸乙酯 10 mL，以旋渦
混合器震盪 15 秒，靜置分層，取上層液，以濾膜過濾，供作檢液。
註：2.5. 及 2.7. 節之實驗須在避光下進行。
2.8.鑑別試驗及含量測定：
精確量取檢液及標準溶液各 20μL，分別注入高效液相層析儀中，參
照 2.6 節條件進行液相層析，就檢液與標準溶液所得波峰之滯留時
間及吸收圖譜比較鑑別之，並由標準曲線求得檢體中葉黃素之含量（
mg/L）。
附註：
1.本檢驗方法之檢出限量為 0.003 mg/L。
2.酒類中有影響檢驗結果之物質時，應自行探討。